■ 基本信息
別名: | pCDFDuet1 |
啟動子: | T7 |
復制子: | CDF |
終止子: | T7 terminator |
質粒分類: | 大腸系列質粒；大腸其它質粒；大腸雙框質粒 |
質粒大小: | 3781bp |
質粒標簽: | N-6×His,C-S |
原核抗性: | Str |
克隆菌株: | DH5a |
培養(yǎng)條件: | 37℃，有氧，LB |
表達宿主: | BL21(DE3) |
誘導方式: | IPTG或乳糖及其類似物 |
5'測序引物: | ACYCDuetUP1：GGATCTCGACGCTCTCCCT DuetUP2:TTGTACACGGCCGCATAATC |
3'測序引物:
| DuetDOWN1:GATTATGCGGCCGTGTACAA T7-ter:TGCTAGTTATTGCTCAGCGG
|
備注: | 同時表達兩個外源蛋白 |
■ 質粒屬性
質粒宿主: | 大腸桿菌 |
質粒用途: | 蛋白表達 |
片段類型: | ORF
|
片段物種: | 多框空載
|
原核抗性: | Str |
真核抗性: |
|
熒光標記: |
|
■ 質粒簡介
pCDFDuet-1質粒是一種原核表達載體， N端含有一個6×His標簽，C端含有一個S標簽。該質粒含有多個常用的酶切位點，便于不同基因克隆。表達由宿主細胞提供的T7 RNA聚合酶誘導，目的基因被克隆到質粒載體上，受噬菌體強轉錄及翻譯信號控制。該質粒還攜帶有CloDF13復制因子、lacI基因和鏈霉素抗性基因。可以使這個pETDuet-1載體在一個適當的宿主菌株的coexpression 4目標基因插入MCS1的基因可以使用ACYCDuetUP1引物和DuetDOWN1引物進行測序。插入MCS2的基因可以用DuetUP2引物和T7進行排序。
pCDFDuet-1 is designed for the coexpression of two target ORFs. The vector contains two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7lac promoter and ribosome binding site (rbs). The vector also carries the CloDF13-derived CDF replicon, lacI gene and streptomycin/spectinomycin resistance gene (SmR). This vector can be used in combination with pACYCDuet?-1 , pRSFDuet?-1, and pETDuet?-1 in an appropriate host strain for the coexpression of 4 to 8 target proteins. ORFs inserted into MCS1 can be sequenced using the ACYCDuetUP1 Primer and DuetDOWN1 Primer . ORFs inserted into MCS2 can be sequenced using the DuetUP2 Primer and T7 Terminator Primer . Unique sites are shown on the circle map.
質粒只保證關鍵序列正確，不保證表達效果。
■ 質粒圖譜
■ 質粒序列
質粒序列請下載：
ZK324pCDFDuet-1大腸雙表達質粒.txt
